La spectroscopie vibrationnelle utilise le fait que les molécules possèdent des fréquences spécifiques pour lesquelles elles tournent ou vibrent avec des niveaux d’énergie discrets appelés modes de vibrations. Ces modes de vibrations absorbent dans le domaine du proche et lointain infrarouge (IR) (de 2 μm à 1000 μm) et peuvent être utilisés comme des signatures moléculaires. Deux phénomènes sont usuellement exploités pour l’imagerie vibrationnelle, l’absorption infrarouge et la diffusion Raman. Ce sont des méthodes non destructives et sans marquage qui permettent l’identification de la composition moléculaire d’un échantillon. Les fréquences des modes de vibrations peuvent être considérées comme liées à la force de la liaison et aux masses atomiques d’une liaison particulière, d’un ensemble de liaisons au sein d’une molécule ou d’un groupe fonctionnel. Les fréquences d’un spectre de vibration d’un matériau donné sont donc caractéristiques de chacune des liaisons des constituants de ce matériau. La spectroscopie vibrationnelle est une méthode de caractérisation largement utilisée en sciences du vivant. La technique OPTIR (Optical PhotoThermal InfraRed spectroscopy) est une nouvelle technique de spectroscopie vibrationnelle utilisant un laser à cascade quantique (QCL) moyen-IR pulsé et accordable, qui induit des effets photothermiques à la surface d’un échantillon lorsque la longueur d’onde IR correspond à l’énergie d’un mode de vibration (i.e. quand l’énergie du laser est absorbée). Cet effet photothermique est mesuré à l’aide d’un laser de sonde, de longueur d’onde dans le visible, focalisé à la surface de l’échantillon. Cette technologie permet des mesures de spectroscopie IR classique ainsi que la réalisation d’images chimiques d’absorption IR, avec une résolution spatiale indépendante de la longueur d’onde IR, submicronique, identique à celle de l’imagerie photonique classique. L’OPTIR offre une mesure d’absorption IR de qualité, sans contact avec la surface. L’objectif de cet article est de présenter cette technique d’imagerie novatrice ainsi qu’une application à la caractérisation de la graine de Brassica juncea.